Thin Layer chromatrography

Thin Layer Chromatography เป็นเทคนิคที่ใช้ในการแยกสารเช่น lipid ตัวค้ำจุน หรือ sopporting medium เป็นแผ่นกระจกที่ถูกเคลือบด้วยตัวดูดซับ หรือ adsorbent เช่น silica gel สารแต่ละชนิดจะถูกดูดซับ ด้วยตัวดูดซับที่ไม่เท่ากัน จึงทำให้เคลื่อนที่ไปบนตัวค้ำจุนด้วยอัตราเร็วที่ไม่เท่ากัน


การทำ Thin Layer Chromatography (TLC)
แผ่น TLC ที่เคลือบด้วย silica gel เรียบร้อย เมื่อนำมาหยดสารตัวอย่างที่ต้องการแยกสารแล้ว นำมาวางในถัง แก้วที่มีตัวทำละลายผสม ตัวทำละลายผสมจะชะสารจากข้างล่างขึ้นข้างบน ในขณะทำการทดลองต้องปิดฝาถัง แก้วเพื่อให้บรรยากาศภายในถังแก้วอิ่มตัวด้วยตัวทำละลายผสม

- Stationary phase เป็น solid หรือ liquid ที่เคลือบบางๆบนผิวของ inert solid support ถูกบรรจุอยู่ใน คอลัมน์แก้วหรือ stainless steel ที่ขดม้วน มีความยาว 1-3 เมตร และมี internal diameter 2-4 mm
- Mobile phase เป็น inert carrier ที่ผ่านเข้าไปในคอลัมน์ที่มี flow rate ที่คงที่


สารประกอบที่ต้องการแยกถูกความร้อนสูง (ไม่เกิน 450 องศาเซลเซียส) จนระเหยเป็นไอหรืออยู่ในสภาวะที่เป็น แก๊ส สารแต่ละชนิดมีความสามารถในการละลายใน stationary phase และ mobile phase ไม่เท่ากัน จึงแยก ออกจากกัน หลังจากออกจากคอลัมน์ สารจะผ่าน detector และถูกบันทึกด้วย recorder


คุณสมบัติของ Liquid ที่เคลือบบางๆบนผิวของ solid support
1. เป็น solvent ที่ดี เมื่อสารละลายได้ดีทำให้ถูกชะออกจากคอลัมน์ได้ช้า ผลการแยกสารจะดี
2. ละลายสารต่างๆได้ไม่เท่ากัน
3. nonvolatile มีจุดเดือดสูง หรือ stable ในช่วงของอุณหภูมิที่ใช้งาน
4. ไม่ทำปฏิกริยากับสารที่ต้องการแยก หรือ mobile phase
มี polarity ใกล้เคียงกับสารที่ต้องการแยก เช่น polyethyleneglycol, methyl phenyl และ methyl vinyl silicon gums, esters ของ adipic, succinic และ phthalic acid และ polyesters


HOME
ที่มา:
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/en/8/8a/Cromatography_tank.png และ http://allserv.ugent.be/aquaculture/ATA/img/tlc.gif